乔军,孟庆龄,陈瑛,何宏彬,夏咸柱根据GenBanK中Barrett报道的犬瘟热病毒Onderstepoort弱毒株的附着或血凝蛋白基因序列,设计合成了能扩增760bp基因片段的半套式引物。用异硫氰酸胍—酚—仿一步抽取法提取细胞总RNA进行反转录,再以此产物进行半套式PCR扩增,并筛选出最佳PCR扩增。结果经半套式PCR扩增能得到与设计片段大小相同的产物,并且不扩增犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒、狂犬病病毒的核酸。敏感性试验表明,此法能扩增出CDV强毒细胞培养物(毒价为10-5.8TCID50/0.1mL)10-6稀释的反转录产物,远高于常规PCR。经初步应用表明,此法可用于天瘟热的临床诊断和实验研究。
2000年06期 [查看摘要][在线阅读][下载 393k] [下载次数:130 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:12 ] |[阅读次数:0 ]