- 沈艳;何长生;刘华;王维;朱良强;
为了解安徽省禽群呼吸道病毒感染情况，2021年3—11月从12个县（市、区）17个家禽屠宰点和1个农贸市场收集472份喉头气管组织样本，运用荧光定量RT-PCR方法，对诱发家禽呼吸道疾病的主要病毒性病原进行检测。结果显示：除未检出高致病性禽流感病毒（AIV-H5、AIV-H7）核酸阳性外，新城疫病毒（NDV）、禽传染性支气管炎病毒（IBV）、禽传染性喉气管炎病毒（ILTV）、禽偏肺病毒（aMPV）均有核酸阳性被检出，平均阳性率分别为9.96%、27.54%、1.06%、5.51%;NDV、IBV、aMPV的春季阳性率高于其他季节，夏季检出病原种类最多；皖南、皖中和皖北区域均有NDV阳性被检出，皖南区域的IBV阳性率最高，皖南、皖中区域均检出aMPV阳性，而ILTV阳性仅在皖北区域被检出；鸡群中的NDV、IBV、ILTV、aMPV阳性率高于鸭群。病毒感染以单一感染为主，占比为86.89%；单一感染中，IBV单一感染占比最高，为66.67%；混合感染中，IBV+NDV和IBV+aMPV双重感染占比较高，分别为45.83%和50.00%，仅检出1份三重感染样本（NDV+IBV+aMPV）。结果表明：安徽省家禽禽流感防控效果较好，但存在不同程度的NDV、IBV、ILTV、a MPV流行，其中IBV最为严重，且这些病原存在一定的季节和区域流行特征。因此，安徽省不同区域应根据不同病原流行特点，采取各有侧重的防控策略，完善疫病监测机制，在重点区域和高发季节加强疫病防控。
2022年08期 v.39;No.351 1-5+45页 [查看摘要][在线阅读][下载 1288K] [下载次数：80 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：0 ] - 李彬;韩晓青;刘平;刘红祥;宋姗姗;于静;范庆增;张宇龙;谭鹏;杜元钊;刘东;
近年来，禽呼肠孤病毒（ARV）在我国白羽肉鸡群中的感染率呈上升趋势，流行范围较广，给我国肉鸡养殖企业带来了较大经济损失。ARV易变异重组，因此全面了解其分子流行病学特征具有十分重要的意义。为了解我国白羽肉鸡群中ARV的遗传变异特点，2020—2021年从山东、河北、福建、安徽、辽宁、江苏等6个省份收集疑似ARV感染样品，采用RT-PCR方法筛选阳性样本，然后对阳性样本进行σC基因（1 088 bp）测序，根据测序结果分析ARV不同基因型分布规律及占比。结果显示：2020—2021年，从6个省份中，经RT-PCR检测，检出ARV阳性样品157份，总阳性检出率为62.1%，不同省份的阳性检出率为44.4%～77.3%。157份阳性样品可分为6个基因型，其中基因1型61份（38.85%）、基因2型41份（26.11%）、基因3型15份（9.56%）、基因4型9份（5.73%），基因5型30份（19.11%），基因6型1份（0.64%）;61份基因1型样品中，38份与标准ARV疫苗株（S1133）属于同一亚分支，另外23份与4599参考株处于单独的另一亚分支。结果表明：我国肉鸡群中存在一定程度的ARV流行；流行的ARV基因型较为复杂，且存在基因1型变异毒株，当前的疫苗株已不能对其提供足够的保护。结果提示，今后需要进一步开展ARV感染监测，评估其流行及变异情况，调整免疫策略，加快新疫苗等防疫技术及产品研发。本研究初步了解了我国部分省份的ARV分子流行病学特征，对我国ARV感染的防控具有重要意义，也为变异株新型疫苗研发提供了依据。
2022年08期 v.39;No.351 6-11页 [查看摘要][在线阅读][下载 1945K] [下载次数：451 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：22 ] |[阅读次数：1 ] - 林裕胜;余明兴;陈长福;张龙;江锦秀;张靖鹏;刘维巍;刘庆华;胡奇林;
为了解福建省鸡场圆圈病毒3型（GyV3）的流行及其VP2基因变异情况，2021年在南平市、龙岩市和福州市的36个鸡场，采集365份疑似GyV3感染病鸡的腺胃样品，通过PCR进行GyV3核酸检测。结果显示：共检出GyV3核酸阳性55份，阳性检出率为15.06%。对5份GyV3阳性样品进行VP2基因序列分析发现，5份样品的VP2基因核苷酸和推导氨基酸序列相似性分别为98.6%～99.9%和98.3%～100%，与参考株山东肉鸡分离株SDAU-1和巴西家鸡分离株核苷酸和推导氨基酸序列的相似性分别为98.3%～99.2%和97.5%～99.2%，均属于Group A分支中的GyV3小分支。结果表明：福建省鸡场存在GyV3流行；其VP2基因遗传序列稳定，可作为GyV3感染流行病学监测的首选基因。本研究为GyV3的后续研究提供了理论依据。
2022年08期 v.39;No.351 12-16页 [查看摘要][在线阅读][下载 1347K] [下载次数：144 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ] - 梁俊超;赵翔;刘红祥;袁飞;李坤;郝尧光;王宗升;王辉之;刘东;杜元钊;
为了解我国猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）的流行及遗传变异情况，2020年对来自7个省的570份疑似PRRSV感染样品进行RT-PCR检测，并对60个PRRSV阳性样品进行ORF5基因测序及分析比较。RT-PCR检测结果显示，2020年送检样品中，PRRSV阳性检出率为23.68%(135/570)，其中保育猪病料的阳性检出率最高，为32.24%(108/335)。同源性对比及遗传进化分析结果显示，60个PRRSV均为PRRSV2（美洲株），主要属于谱系1和谱系8，占比分别为51.67%和43.33%。氨基酸分析结果显示，60个PRRSV的GP5蛋白氨基酸以点突变为主，其中10个PRRSV的GP5蛋白氨基酸出现缺失突变，且非中和表位、中和表位、潜在毒力位点及N-糖基化位点均发生不同程度的变异。结果表明，保育猪群为PRRSV高发病群体，谱系1 PRRSV或已成为国内流行优势毒株，且PRRSV不断发生变异，这或许会影响现有疫苗的免疫保护效果。因此，针对PRRS需要综合防控，除选用安全有效的PRRSV弱毒活疫苗进行免疫外，加强猪场生物安全及饲养管理也极其重要。
2022年08期 v.39;No.351 17-25页 [查看摘要][在线阅读][下载 3524K] [下载次数：571 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：18 ] |[阅读次数：0 ] - 韩斌;高艳;贾燕青;白崇生;薛九州;
为系统评估榆林市猪伪狂犬病（PR）防控成效，2014—2015年采用问卷调查与采样检测相结合的方法，对榆林市猪伪狂犬病病毒（PRV）疫苗免疫及感染情况进行了调查。结果显示：榆林市散养户基本不进行PRV疫苗免疫，PRV-gE抗体阳性率高达47.50%；规模猪场中免疫场占比仅为43.94%,PRV-gE抗体阳性率为15.40%；用PRV gE基因缺失疫苗免疫过的猪群中依然能检测到PRV-gE抗体，gE抗体阳性率为8.46%，且仔猪和育肥猪群中gE抗体阳性率较高，分别为34.36%和20.95%。结果表明，2014—2015年榆林市的PRV疫苗免疫效果较差，野毒感染较为严重。为探索科学的PR净化方案，2016—2020年选取能真实反映榆林市平均流行水平的某县进行PR净化示范建设，通过临床调查、实验室检测，划分场群类型，分类实施不同净化和免疫方案，取得了较好的净化效果。至2020年，规模场PRV-gE抗体阳性全部降为0，平均免疫抗体（gB抗体）阳性率达到90%；散养户PRV-gE平均抗体阳性降为3.20%,gB抗体阳性率达到75.00%；产死胎、木乃伊胎及弱仔数与净化前相比下降90%以上。结果表明，该县的PR净化示范工作取得了成功，净化经验可向全市推广，以最终实现全市PR净化目标。
2022年08期 v.39;No.351 26-30页 [查看摘要][在线阅读][下载 1364K] [下载次数：152 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 贾培龙;冉红志;陈敏艳;张旭辉;
2022年2月，陕西省延长县一养殖户饲养的21只猪先后发生不明原因死亡，经陕西省动物疫病预防控制中心及市县实验室联合诊断，证实此次疫情是由炭疽杆菌引起的猪炭疽病。为查明病菌来源，摸清感染路径，按照重大动物疫病流行病学调查相关流程，省、市、县相关部门组建专项工作组赴现场开展流行病学调查，分析疫情来源和传播途径，估测疫情扩散风险，指导开展疫情处置工作。综合流行病学特征及临床症状、实验室镜检结果，推测本次疫情很可能是历史疫源地炭疽杆菌意外暴露，通过人员、草料、交通工具传播引起的。本次疫情警示，对于历史疫源地要控制土壤的随意开挖，做好范围内养殖场的生物安全管理，加强包括猪、牛、羊在内所有炭疽易感家畜的炭疽防控。
2022年08期 v.39;No.351 31-34页 [查看摘要][在线阅读][下载 1364K] [下载次数：119 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 王雯琼;柳海;徐胜威;葛明峰;许昊川;江维洁;
为了解浙江省宁波市南美白对虾主养区虾肝肠胞虫（EHP）、十足目虹彩病毒1(DIV1)的流行规律，2021年3—9月，在宁波市鄞州、象山、宁海、奉化等地区的15个养殖场共采集119批次南美白对虾养成期样本，采用PCR方法检测EHP和DIV1。结果显示：EHP批次阳性率为26.9%(32/119),DIV1批次阳性率为10.9%(13/119),EHP+DIV1混合感染批次阳性率为2.5%(3/119);EHP批次阳性率在各个养殖区域之间差异不显著（P> 0.05），象山的DIV1批次阳性率最高，为30.4%(7/23)，显著高于奉化（P <0.05），但与其他两地差异不显著（P> 0.05）;EHP批次阳性率在体长3 cm以上的虾样中显著高于小于3 cm的虾样（P <0.05），而DIV1批次阳性率在不同体长对虾中均无显著差异（P> 0.05）;EHP批次阳性率4—5月显著低于6—9月（P <0.05）,DIV1批次阳性率7—8月显著高于其他月份（P <0.05）;EHP在体表发红症状的批次中未检出，在其余症状的批次中均有检出，DIV1在有体表发红症状的批次中阳性率较高，为91.0%(10/11)。结果表明：EHP在宁波市流行严重，主要流行于体长大于3 cm的养殖中后期对虾，前期感染症状不明显；DIV1流行得到一定的控制，现主要流行于体长3～6 cm的对虾，体表发红是DIV1感染的重要病症；两种病原在夏季都有较强的流行趋势，需针对性加强防控。本监测初步掌握了宁波市南美白对虾中EHP和DIV1的流行规律，为宁波市南美白对虾病害防控提供了参考。
2022年08期 v.39;No.351 35-39+55页 [查看摘要][在线阅读][下载 1343K] [下载次数：223 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 景宏丽;刘晓飞;梅琳;仇松寅;徐立蒲;张舟;张旻;王娜;袁向芬;吴绍强;
为评估传染性造血器官坏死病病毒（infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV）随国际贸易传入我国的风险，按照世界动物卫生组织（WOAH）动物卫生风险评估框架，从危害识别、风险评估及风险管理3个方面开展风险分析。结果显示：IHNV随活易感鱼类（包括亲鱼、鱼卵和鱼苗）和鲜活饵料鱼类（野杂鱼）传入的风险为“高”；随非易感鱼类及运输活鱼的水、包装、运输工具和用具等传入的风险为“很低”；随食用易感鱼类（包括活的、冷冻的、冰鲜的以及鱼肉）和易感鱼加工产品传入的风险为“可忽略”。根据以上风险评估结果提出相应风险管理措施：不从疫区进口高风险产品，低风险产品可以自由贸易，对来自疫区的非易感鱼类和运输活鱼的水、包装、运输工具和用具实施消毒。
2022年08期 v.39;No.351 40-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 1312K] [下载次数：168 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ]
- 房立春;胡宇航;李月涛;刘涛;亓丽红;吴家强;赵鹏;朱鸿飞;
为分析CpG基序寡聚脱氧核苷酸（CpG DNA）对H9亚型禽流感病毒（AIV-H9）灭活疫苗的免疫增强作用，利用商品化的含有CpG DNA的重组质粒作为AIV-H9灭活抗原的免疫佐剂，经肌内注射1、7、21日龄的SPF鸡，通过检测鸡血清中HI抗体和外周血淋巴细胞CD4、CD8基因相对表达量，分析CpG DNA重组质粒对不同日龄SPF雏鸡首次免疫AIV-H9灭活疫苗免疫效果的影响。结果显示：1、7和21日龄SPF鸡首免后，CpG DNA免疫增强剂添加组的HI抗体滴度明显高于未添加组（P≤0.05）,HI抗体峰值滴度升高了近2log2滴度，差异极显著（P≤0.01），且上升速度更快；CpG DNA免疫增强剂添加组，在21日龄免疫时的免疫效果明显优于1日龄和7日龄免疫组，表现为HI抗体上升速度更快，峰值更高，离散度更小；首免3周后，7日龄和21日龄SPF鸡CpG DNA免疫增强剂添加组的CD4、CD8基因相对表达量均高于同日龄未添加组，且明显高于1日龄SPF鸡组（P≤0.01）。结果表明，CpG DNA能显著增强鸡对AIV-H9灭活疫苗的特异性体液免疫反应，可以作为高效的免疫增强剂，尤其在21日龄使用时免疫效果更好。本研究为CpG DNA重组质粒在禽流感疫苗上的联合应用以及研制新型复合佐剂疫苗提供了依据。
2022年08期 v.39;No.351 97-102页 [查看摘要][在线阅读][下载 1503K] [下载次数：477 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 范庆增;李彬;刘红祥;周建超;谭鹏;刘东;
为了解鸡滑液支原体灭活疫苗（YBF-MS1株）的临床应用效果，分别对未免疫和免疫2次YBF-MS1疫苗后种鸡的产蛋率、孵化率、后代呼吸道和腿病发生率以及商品蛋鸡的产蛋下降率和破蛋率进行比对和分析。结果显示：免疫2次YBF-MS1灭活疫苗后，种鸡产蛋率提高1.2%～15.8%，种蛋孵化率提高0～7.3%，后代发病率降低16.7%～75.0%；商品蛋鸡产蛋下降率改善16.7%～100%，破蛋率下降25.0%～100%。结果说明：YBF-MS1灭活疫苗对滑液囊支原体（MS）感染具有较好的保护效果，可显著提高种鸡产蛋率、种蛋孵化率，降低商品代鸡的发病率，同时减少商品蛋鸡顶端异常综合征（EAA）的发生。本研究为科学评价滑液支原体灭活疫苗（YBF-MS1株）的临床应用效果提供了数据支撑。
2022年08期 v.39;No.351 103-106页 [查看摘要][在线阅读][下载 1329K] [下载次数：316 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] |[阅读次数：1 ] - 南文龙;巩明霞;陆游;李金明;王永杰;哈达;吴发兴;李林;王英丽;陈义平;吴晓东;
为快速特异检测羊痘病毒属病毒（CaPVs），比较了牛结节性皮肤病病毒（LSDV）、山羊痘病毒（GTPV）和绵羊痘病毒（SSPV）的全基因组序列，选择保守区域设计特异性引物和探针，建立了一种CaPVs通用的Cycleave PCR检测方法。特异性结果显示，该方法在40 min内即可检出CaPVs，与口蹄疫病毒、羊口疮病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、蓝舌病病毒均无交叉反应；灵敏性结果显示，最低检出限为4.98 copies/μL；重复性结果显示，批内和批间重复变异系数均小于2%。对131份临床样本进行检测发现，该方法与世界动物卫生组织（WOAH）推荐的常规PCR方法相比，敏感性为100%，特异性为91.55%，总符合率为95.42%。以上结果表明，本研究建立的Cycleave PCR检测方法特异、敏感、重复性好，且操作简便，适用于CaPVs的高通量、快速检测。
2022年08期 v.39;No.351 107-111页 [查看摘要][在线阅读][下载 1708K] [下载次数：194 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 侯丽娜;于明华;刘春羽;赵洪哲;郑秉武;温永俊;王凤雪;
为获得牛传染性鼻气管炎病毒（infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV）gI蛋白单克隆抗体，构建了gI截短基因重组原核表达质粒pET-32a-gI，并对其进行了诱导表达和纯化，通过SDS-PAGE和Western blot验证了gI蛋白在大肠杆菌内的表达情况。将纯化的gI蛋白免疫BALB/c小鼠，通过细胞融合、筛选及亚克隆，得到针对IBRV gI蛋白的单克隆细胞株gI14。利用体内诱生法制备抗IBRV gI蛋白单克隆抗体腹水，使用Western blot和间接免疫荧光（IFA）对单克隆抗体特异性进行检测和验证。Western blot结果显示：原核表达的gI融合蛋白相对分子质量为34 ku,gI蛋白单克隆抗体与gI表达蛋白反应性良好，与pET-32a（+）空载体蛋白无特异性结合；天然表达的gI蛋白相对分子质量为45 ku,gI蛋白单克隆抗体与细胞内感染的IBRV所表达的gI蛋白反应性良好。IFA结果显示，gI蛋白单克隆抗体及阳性对照组IBRV多抗均能与细胞内感染的IBRV发生特异性结合，使细胞出现特异性绿色荧光信号，而空白及阴性对照组均未见绿色荧光信号。结果表明，本研究基于高效表达的gI蛋白，成功制备了1株能稳定表达gI单克隆抗体的细胞株gI14，获得的gI蛋白单克隆抗体与原核表达的gI蛋白及IBRV全病毒均能特异性结合，这为进一步研制IBRV诊断试剂盒及探究IBRV gI蛋白抗原表位及蛋白功能奠定了基础。
2022年08期 v.39;No.351 112-119页 [查看摘要][在线阅读][下载 1833K] [下载次数：364 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 赵以恒;崔颢月;郭鑫;罗健雅;黄紫贝;陈诗涵;刘金彪;王海燕;刘文博;
2020年8月底，江苏省某猪场断尾、阉割仔猪出现大量急性死亡，病情持续2个月左右。为确诊引起死亡的原因，11月中旬，对送检的4只发病仔猪进行了剖检和实验室诊断。根据流行史、临床症状、剖检病变，以及心血涂片和脏器触片检查结果进行初步诊断，结合细菌和分子生物学检测结果进行确诊。结果显示：剖检病变多呈黄染、败血性变化，脏器触片检查观察到大量球形、圆形蓝紫色细菌；经16S rRNA序列比对，病变组织中分离、纯化的细菌被鉴定为溶血性葡萄球菌；心血涂片检查发现大量红细胞变形，呈星芒状、锯齿状和半月状等不规则形状，符合附红细胞体特征，且经PCR扩增出特异性条带。最终确诊，引起该规模猪场仔猪死亡的病因为附红细胞体与溶血性葡萄球菌混合感染。根据诊断结果针对性给药，5 d后该猪场疫情得到有效控制。本病例的诊断结合了现代分子生物学方法和经典检测方法，这对于混合感染的诊断有着重要作用。
2022年08期 v.39;No.351 120-126页 [查看摘要][在线阅读][下载 1625K] [下载次数：154 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 刘俊;杨作丰;张皓淳;魏澍;陈扬扬;吴晓傲;王宏燕;庞学敏;董娜;刘金玲;
为验证碾压消毒垫和驶过消毒池两种常见运输车辆消毒方式对非洲猪瘟病毒（ASFV）的杀灭效果，采用生物学特性和理化特性相近的猪伪狂犬病毒（PRV）疫苗稀释液喷洒运输车辆车轮，测试两种消毒方式的消毒效果。结果显示：车辆碾压消毒垫后0、1、2、3、4、5 min以及驶过消毒池后0、2、5、10 min，车轮可被检测的PRV与表面细菌含量均呈下降趋势，且杀灭效果随时间增加而增强。其中，碾压消毒垫后5 min无法有效杀灭所有PRV，细菌杀灭率为92.5%；驶过消毒池后10 min可有效杀灭所有PRV，细菌杀灭率为98.3%。本研究结果为提高非洲猪瘟疫情应急处置水平和日常防控消毒措施有效性提供了数据支撑。
2022年08期 v.39;No.351 127-131页 [查看摘要][在线阅读][下载 1307K] [下载次数：147 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] 下载本期数据